以下是BBI Solutions ELISA試劑盒使用流程
2023-07-13 581
BBI Solutions是一家生物技術(shù)公司,提供各種ELISA(酶聯(lián)免疫吸附法)試劑盒。ELISA試劑盒用于檢測(cè)特定蛋白質(zhì)、抗體或其他生物分子的存在和濃度。適用于多個(gè)應(yīng)用領(lǐng)域,包括但不限于醫(yī)學(xué)診斷、生物藥物研發(fā)、免疫學(xué)研究和環(huán)境監(jiān)測(cè)。它們可用于檢測(cè)感染性疾病標(biāo)志物、腫瘤標(biāo)志物、自身抗體、植物病原體以及其他生物分子的存在和濃度。
BBI Solutions ELISA試劑盒的工作原理基本相同,包括以下步驟:
固定:將待檢測(cè)的目標(biāo)分子固定在試驗(yàn)板上。
檢測(cè):加入特異性抗體與目標(biāo)分子結(jié)合,形成抗原-抗體復(fù)合物。
探針:添加與復(fù)合物結(jié)合的酶標(biāo)記探針,如辣根過氧化物酶(HRP)。
底物:加入一種能夠被酶催化產(chǎn)生可檢測(cè)信號(hào)的底物。
檢測(cè)信號(hào):底物受酶催化后產(chǎn)生的反應(yīng)產(chǎn)物會(huì)生成可視化信號(hào),如顏色變化。
分析:通過讀取儀器或觀察顏色變化來量化目標(biāo)分子的濃度。
以下是一般的BBI Solutions ELISA試劑盒使用流程:
樣品準(zhǔn)備:準(zhǔn)備待測(cè)樣品,可以是血清、血漿、細(xì)胞上清等。根據(jù)試劑盒的要求,對(duì)樣品進(jìn)行必要的稀釋或處理。
樣品加標(biāo)和空白控制:根據(jù)試劑盒的要求,將樣品加標(biāo)到試劑盒提供的孔板中。同時(shí),將一些孔位用于空白控制,即不加入樣品,用純凈溶液代替。
孔板洗滌:將孔板放入試劑盒提供的洗滌緩沖液中,輕輕搖晃或輕輕拍打孔板,使洗滌液充分覆蓋每個(gè)孔位。然后將洗滌液倒出,重復(fù)此步驟2-3次。
加入酶標(biāo)抗體:將試劑盒提供的酶標(biāo)抗體逐孔加入到孔板中,確保每個(gè)孔位都加入相同的量。輕輕搖晃或輕輕拍打孔板,使酶標(biāo)抗體充分接觸到樣品中的目標(biāo)分子。
孔板洗滌:重復(fù)步驟3,將孔板洗滌干凈。
加入底物:將試劑盒提供的底物逐孔加入到孔板中,確保每個(gè)孔位都加入相同的量。輕輕搖晃或輕輕拍打孔板,使底物與酶標(biāo)抗體反應(yīng)。
反應(yīng)孔板:將孔板放置在黑暗條件下,根據(jù)試劑盒的要求,反應(yīng)一定的時(shí)間,使底物與酶標(biāo)抗體反應(yīng)產(chǎn)生顏色反應(yīng)。
反應(yīng)終止:根據(jù)試劑盒的要求,加入試劑盒提供的反應(yīng)終止液,停止底物的反應(yīng)。
測(cè)量光密度:使用酶標(biāo)儀或光密度計(jì),測(cè)量每個(gè)孔位的光密度值。根據(jù)試劑盒的要求,選擇適當(dāng)?shù)牟ㄩL(zhǎng)進(jìn)行測(cè)量。
數(shù)據(jù)處理和分析:根據(jù)試劑盒的說明,使用內(nèi)標(biāo)或標(biāo)準(zhǔn)曲線等方法,計(jì)算出待測(cè)樣品中目標(biāo)分子的濃度或相對(duì)含量。